江西种植的最贵药材天麻蜜环菌萌发菌母种生产技术又是怎样一种奇迹
在江西种植的最贵药材,天麻的人工栽培过程中,关键在于两种共生菌——萌发菌和蜜环菌的合理培养。笔者经过实践探索,成功研发出适宜这两种共生菌生长的培养基及生产技术。以下是具体步骤:
培养基配制
1.1 在双重锅中煮沸马铃薯、硬杂木屑、麦麸和玉米面,然后过滤取液体,补水至1000毫升,加葡萄糖20克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁1克以及蛋白胨溶液(含0.5%蛋白胨),摇均后分装于三角瓶或试管内,每个容量约150毫升或试管容积的四分之一。
1.2 制作固体斜面培养基时,将上述液体加热至溶化琼脂18克,再加入葡萄糖20克等辅料并调节至1000毫升。将此混合物倒入试管内,填充到一半,并用棉花塞紧口部。
1.3 木屑培养基由硬杂木屑50%、玉米芯25%、麦麸15%和玉米面10%组成,上述可溶解辅料按比例加入原料中,使其含水量为70%,然后装入试管压实至一半高度,用棉花塞紧口部。
灭菌
使用手提式高压灭菌锅或民用高压锅进行灭菌。
液体和斜面固体培养基,在蒸汽压力为14千帕时保持30分钟后自然降温。
木屑培养基在蒸汽压力为14千帕时保持45~60分钟后自然降温。
接种
在无菌条件下严格按照无菌操作要求接种。
对液体培养基,可从母株试管挑取带有繁殖器官的少量母株块放入三角瓶;对斜面培养基,当凝结水形成时接种蜜环菌,每支接入几片母株;当表面无凝结水时则是萌发菌,每支也可适当数量地添加几片母株。
培養
放置在恒温箱或者室内,以22℃~24℃温度下进行恒温育苗。在一定时间之后,如液态细胞开始振荡,可以停止育苗,但需注意观察是否出现污染迹象,如浑浊或大量泡沫等。如果一切正常,则可以用于生产。此外,这两类共生微生物分别需要不同的保存期限,一般情况下可存放在冰箱里以延长有效期。