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农村常见60种野生中草药中的天麻蜜环菌与萌发菌母种生产技术又是什么样的呢

在人工栽培天麻的有性繁殖过程中,需要萌发菌和蜜环菌这两种共生菌的协同作用。经过实践探索,我成功研发出适合这两种共生菌生长的培养基及生产技术。以下是具体操作步骤:

培养基配制

1.1 在双重锅中煮沸1000mL水,加入100g马铃薯(去皮、切片),50g硬杂木屑、玉米面和麦麸各50g。在煮沸后过滤,用滤液补至1000mL,加20g葡萄糖、2g磷酸二氢钾、1g硫酸镁以及蛋白胨10mg和VB1 10mL。将所有物质溶解并摇匀后,将其分装于500mL三角瓶或罐头瓶,每个约150mL,也可装入试管内,量为试管容积的四分之一。使用棉花塞口,并以皮筋扎紧。

特点:此方法技术含量高,可快速繁殖,但不能长期保存。

1.2 固体斜面培养基参照上述步骤制作,但加入18g琼脂,并补水至1000mL,再加入20g葡萄糖等辅料均匀混合,然后装入试管内,填充至容积之四分之一,用棉花塞口。

特点:耐储存,便于邮寄。

1.3 木屑培养基由硬杂木屑50%、玉米芯25%(粉碎成小颗粒)、麦麸15%和玉米面10%组成,同时添加各种营养素如葡萄糖、蔗糖等,使其含水率70%,然后压实并封口用棉花塞。

特点:便于贮藏,便于邮寄。

灭菌

使用手提式高压灭菌锅或民用高压锅进行灭菌。

对液体与固体斜面的培养基,在蒸汽压力达到1.4kg/平方厘米时保持30分钟待冷后出锅;接种前需温度降至25℃以下。

对木屑培养基则在相同条件下保持45~60分钟自然降温后出锅。

接种

必须在无菌条件下严格按照无菌操作要求进行接种。

液体培养基只需挑取一块带有菌丝的母种放入三角瓶中;对于固态斜面则趁凝结水时接種,一般每支试管上加一到三个母种块;对于木屑,则立即接種,不得存放。

培養

接種後,要將試管放置於恒温箱或文化室內,在22~24℃溫度下進行恒温育苗。一旦开始振荡应从第二天开始,以促进植物生長。当液體品質達到清澈透明且略帶淡茶色時,即完成營養過程。此外,对於顯示污染迹象的樣本應丟弃重新開始。如果想要延長保存時間,可以將已經完全發芽的植物移至冰箱低溫儲存,以維持品質不變。