常见100种中药中的天麻蜜环菌萌发菌母种生产技术又该如何操作呢
在人工栽培天麻的有性繁殖过程中,需要萌发菌和蜜环菌这两种共生菌的协同作用。经过实践探索,我成功研制了适合两种共生菌生长的培养基及生产技术。以下是具体操作步骤:
培养基配制
1.1 在双重锅中煮沸1000mL水,加入100g马铃薯(去皮、切片),50g硬杂木屑、玉米面和麦麸各50g,30分钟后过滤取液,用此液补至1000mL,再加入20g葡萄糖、2g磷酸二氢钾、1g硫酸镁以及蛋白胨10mg和VB1 10mL等溶解物质后摇均分装于500mL三角瓶或罐头瓶内,每个试管装填容积的四分之一,并用棉花塞口。
1.2 制作固体斜面培养基时,将上述液体材料中的琼脂18g加热溶化后再加水至1000mL,加入20g葡萄糖、2g磷酸二氢钾、1g硫酸镁以及蛋白胨5mg和VB11mg,然后摇均分装于试管内,以容积四分之一为量,用棉花塞口。
1.3 木屑培养基由50%硬杂木屑25%玉米芯粉碎成小颗粒状15%麦麸10%玉米面外加0.5%葡萄糖0.5%蔗糖石膏石灰磷酸二氢钾硫酸镁与2%VB组成,在含水70%,拌均后装入试管压实到半满。
灭菌
使用手提式高压灭菌锅或民用高压锅进行灭菌。在蒸汽压力达到14kg/平方厘米时保持30分钟左右自然降温出锅。
接种
在无菌条件下严格按照无菌操作要求接种母种。
培养
接种后的培养箱应设定恒温22~24℃环境。在培育过程中,从第二天开始启动摇床振荡或者每日手动搓动6~8次。如果使用的是试管,则在搓动后需将其倾斜放置。七天之后可终止培育,当浆液清澈透明且呈淡茶色或土黄色时即可用于生产;如果出现混浊或形成膜状泡沫则说明污染,可丢弃。
对于斜面和木屑两类生物材料,其接种时间分别为48小时及15~20天。当生物丝穿越整个材质并贯通到底部时,即可用于生产。此类存储在冰箱零度至四度摄氏度处,可保存40天以上以供未来使用。
通过这样的方法,我们不仅提高了效率,还确保了产品质量,为未来的应用提供了坚实保障。