在一亩地种黄精我们需多少萌发菌母种才能孕育出天麻蜜环菌的生产技术呢
在人工栽培天麻的有性繁殖过程中,需要萌发菌和蜜环菌这两种共生菌的协同作用。为了提高生产效率,我通过实践研究,成功制备了适合两种共生菌共同生长的培养基,并发展了一套相应的生产技术。以下是具体操作步骤:
培养基配制
1.1 将马铃薯去芽眼、去皮后切片,与硬杂木屑、麦麸、玉米面各50g一起放入双重锅中,用自来水或天然水1300mL煮沸30分钟,然后过滤取液并补充至1000mL,加葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g以及蛋白胨0.5%和10mLVB1等添加剂后摇匀,每瓶装150mL左右,可装于三角瓶或试管内,使用棉花塞口。
1.2 制作固体斜面培养基时,将上述液体混合物加热溶化,再加入琼脂18g,使其完全溶解,然后用水补充至1000mL,在热状态下加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g以及蛋白胨5g和10mgVB1等成分,一律用水稀释至1000mL后摇均,每个试管填充量为容积的四分之一,用棉花塞口。
1.3 木屑培养基则采用硬杂木屑50%(粉碎成小颗粒)、玉米芯25%(粉碎成小颗粒)、麦麸15%,玉米面10%,外加葡萄糖0.5%、蔗糖0.5%及石膏石灰各比例配比后的原料与辅料拌均使之含水70%,然后装入试管适当压实,以供接种。
灭菌
使用手提式高压灭菌锅进行灭菌,其中液体和固体培养基保持蒸汽压力为14kPa时稳定保持30分钟;木屑培养基则保持45~60分钟。在自然降温后,将所有材料直接放入接种箱中进行接种。注意在出锅前要确保内部冷空气排尽以防止冲掉棉塞。
3 接种
在无菌条件下严格按照无菌操作要求进行。
- 对于液体培养基,只需从母种试管挑取一到两个带有微生物丝的小块植入三角瓶内。
- 对于斜面培養基,当凝结水形成时就可以开始接種,每支試管上可加入一到三个小块母種;对于萌發菌,则在表面的凝结水消失之后再开始每支試管上可加入一到两个小块母種。
- 木屑培養基地立即滅絕後進行接種,並且要將種子與土壤緊密聯繫,以利於微生物生長,並立即竖立放置避免振动影响根系伸展。15-20天後當毛細或植物細胞連通時,即為產業使用準備好狀態。此時,可以將其存放在冰箱內保存6個月不變質,但需要破開試管底部才可重新播種以防止污染。
4 培養
接種後,要將其放置於恒溫箱或者常溫室內,在22℃~24℃恒温条件下進行氣候控制。
- 液體調理品從第二天開始進行搖晃過濾器以促進營養物質分布並維持淨化環境。一旦它們成為清澈透明色或淡茶色,這些產品就已經完成製作。但如果他們顯示混濁狀況或者泡沫,那麼可能會受到污染,因此應該丟棄這些產品。
- 斜面調理品則需平放48小时後觀察是否有植物細胞活動逐漸擴散延伸達到十幾天時即可用于生产。当它们贯穿整个斜面的时候,这意味着它们已经准备好被用于产品制造。这类产品可以保存40日至60日,而温度低于4°C的情况下更能保证质量不受影响。
- 木材調理品則應該垂直設置避免震動影響根系伸展。經過15-20天時間當毛細或植物細胞連通時,即為產業使用準備好狀態。此時,可以將其存放在冰箱內保存6個月不變質,但需要破開試管底部才可重新播種以防止污染。