什么一亩药材一年能收5万难道不是天麻蜜环菌萌发菌母种生产技术让它得以繁荣吗
在人工栽培天麻的有性繁殖过程中,需要萌发菌和蜜环菌两种共生菌的协同作用。笔者经过实践探索,成功制定了适宜两种共生菌生长的培养基配方及生产技术。以下是具体操作步骤:
培养基配制
1.1 使用马铃薯100g(去芽眼、皮、切片)、硬杂木屑50g、麦麸50g、玉米面50g和自来水1300mL进行液体培养基制作。将其煮沸30分钟后过滤取液,补水至1000mL,然后加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g以及蛋白胨0.5%溶解物10mL,将所有成分均匀混合后分装于500mL三角瓶或罐头瓶中,每个容量约150mL,可选择装入试管内,每个为试管容积的四分之一,用棉花塞口;罐头瓶用双层牛皮纸或四层报纸上盖一层塑料布封口并用皮筋扎紧。
1.2 制作固体斜面培养基时,将“1.1”步骤中的滤液加热溶化并补水至1000mL,再加入琼脂18克,加热使之完全溶解,然后补充至1000毫升,并加入葡萄糖20克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁1克和蛋白胨5克,以及VB11毫克,全部混合均匀后每个试管装填为容积的一部分,上盖棉花。
1.3 制作木屑培养基时,将硬杂木屑50%,玉米芯25%(粉碎成小颗粒),麦麸15%,玉米面10%混合在一起,并添加葡萄糖0.5%、蔗糖0.5%石膏石灰各相应比例,以便形成70%含水量的地质样品。在原料与干燥材料充分拌合后,将可溶性辅助剂如葡萄糖等稀释到所需浓度,在此基础上倒入地质样品,使其含有适当湿润程度,再压实装入试管中,每个填满半杯以上,用棉花塞口。
2灭菌
使用手提式高压灭菌锅或者民用高压锅进行灭菌。
对于液体和固体斜面的培养基,在达到蒸汽压力为14公斤/平方厘米时保持30分钟,待温度降低到50~70℃出锅。接种前,让液态培养基自然冷却至25℃以下;固态斜面则在凝结状态下倾斜放置直到自然凝固之后再移至接种箱内。
木屑培养基则需要45~60分钟时间以确保内部环境被彻底消毒,从而保护其中孕育的微生物健康生长。在冷却过程中要避免任何外部污染因素进入,以防止细菌污染。
3接种
必须严格遵循无菌操作条件完成接种工作。
对于液态细胞,无需特别处理,只需从母株试管挑取大小与花生仁相似的母株块直接放入三角瓶内。如果是用于固定型细胞,则可以减少子块大小。
对于固定型细胞,不论是否采用蜜环还是萌发机制,都需要在凝结水出现时进行接種。此时每支测试器具上的表面积至少应包含一次性大概数量范围从一到三个子的单独母株块;对于萌发机制,如果没有凝结水的情况下,则应该等待表面的沉淀完全清除之前再开始植根过程。这一步骤不论何情形都要求每支测试器具最多包括两个子块作为原始植物来源。
在最后一步,即木材吸收后的准备阶段,无需存储,而应尽快进行植根操作。当完成植根动作之后,请确保所有植物材料紧密连接以促进最佳增长结果,并立即摆放在室温或较温暖区域稳定的环境下继续发展直到它们能够独立生活。
4培養
完成植根程序后的植物材料应当立即放置在恒温控制箱或更专业设备提供良好的光照条件下的实验室供进一步发展。在22~24摄氏度温暖且光线充足的地方维持一定时间,有利于植物迅速成熟并提高质量。一旦检测出初期生命迹象,就开始通过轻微振动帮助营造一个更加健康愈合环境。如果是在标准玻璃或塑料容器中,那么为了防止混乱移动,这些行李可能会被稍微倾侧。而通常情况下,一周左右就能观察出明显生命迹象,当这些新生命遍布整个空间并且呈现出来已知特征标志时,它们就已经准备好被采集用于生产了。不幸的是,如果发现任何异常,如颜色变深或者形成泡沫,那么这个周期就会因为污染而失败,从而不得不重新开始这段旅程寻找纯净产品。
对于那些排列在地台上的苗床,我们建议平铺方式保存48小时以便观察最初生命活动。当第十几天的时候,可以看得出来某些线条穿越整个体系,这意味着它已经做好了投产前的准备。一旦这种能力达到了,我们知道我们的项目已经取得了重大进展,可以安全地让它们休息40天(蜜环)或者60天(莱姆)期间不受影响,同时享受冰箱里的安宁环境。这是一次漫长但必要的人类努力,因为我们正在创造一种强大的药材产品,其中蕴藏着未来的希望。