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金线莲种植加盟天麻蜜环菌与萌发菌母种生产技术又将如何

在人工栽培天麻的有性繁殖过程中,需要萌发菌和蜜环菌这两种共生菌的协同作用。经过实践探索,我成功研制了适合两种共生菌生长的培养基及生产技术。以下是具体操作步骤:

培养基配制

1.1 在双重锅中煮沸100g马铃薯(去芽眼、皮)、50g硬杂木屑、50g麦麸、玉米面,并加入1300mL自来水或天然水。在煮沸30分钟后,用双层纱布过滤取出液体,补充至1000mL,然后加入20g葡萄糖、2g磷酸二氢钾、1g硫酸镁以及蛋白胨0.5%和10mLVB1。将所有物质溶解并摇匀后,将其分装于500mL三角瓶或罐头瓶内,每个容量约150mL,可也装入试管内,每个装满试管容积的四分之一。三角瓶和试管用棉花塞口,而罐头瓶则用2层牛皮纸或4层报纸上盖一层塑料布封口并扎紧。

1.2 制作固体斜面培养基时,将“1.1”步骤中的滤液与18g琼脂混合,加热溶化后,再次补充至1000mL,加入20g葡萄糖、2g磷酸二氢钾、1g硫酸镁以及5mgVB1全部溶解并摇匀后,将其分装于试管内,每个容量为试管容积的一半,然后用棉花塞口。

1.3 制作木屑培养基时,将硬杂木屑50%、玉米芯25%(粉碎成小颗粒状)、麦麸15%和玉米面10%,外加葡萄糖0.5%蔗糖0.5%石膏10%石灰5%,磷酸二氢钾2%,硫酸镁10%,以及VB120%,将原料与干料拌均,再将可溶性的辅助剂溶于水中并拌入原料中,使之含水70%,然后充分拌均后填入试管,并适当压实,以每个容量为一半,然后用棉花塞口。

灭菌

使用手提式高压灭菌锅或者民用高压锅进行灭菌。

对于液体和固态培养基,在蒸汽压力达到14kg/cm²时保持30分钟,当温度降至50℃到70℃之间时出锅;待液体冷却至25℃以下即可接种;对于固态斜面培养基,在形成凝结水之后进行接种,一旦凝结水出现,即可开始接种,每支试管上可以添加一次母种;对于固态木屑培养基,则在蒸汽压力达到14kg/cm²时保持45-60分钟自然降温后出锅直接放入接种箱。

3 接種

在无菌条件下严格按照无菌操作要求进行。

- 对于液体培养基,从母源試管挑取大小相等於花生仁大小的母亲块(带有孢子)到三角瓶或罩杯中。

- 对於斜面的植物材料,蜜環霉需在表面呈现凝結時進行種植,一般為48小时左右開始看見孢子的發育並逐漸向周圍延伸達到第十個日時即可用于生产。当整个孢子网被染色且完全覆盖整个底部的时候,它就可以用于生产了。如果保存在冰箱里,可以存储40天以上以供使用。

4 培養

将已經種植好的植物材料放在恒溫箱或者實驗室內,以22-24°C為恒溫條件進行長期維護。

- 液態種植:從第二天開始定期搖晃器動作,通常每天要手工搖動6-8次。一旦蘆葦轉變為淡茶色,這意味著它已經準備好使用。此時應立即將其運送給產業處理。不潔净的情況下,如浊度增高或者表層形成膜狀物質則表示污染,因此這些樣本應被丟棄掉。

- 斜面的種植:平放48小時後觀察是否發現孢子的活動,並逐漸擴展周圍環境直到第十日才算完成。此時間可能會因為不同的情況而有所不同。在冰箱裡保存能夠持續40天以上不失效。

- 木材細胞種植:由於需要防止細胞振盪,所以將試針竪置放置以免影響細胞健康。一旦通過15至20日后的數據顯示該生物體已經穿透整個試針底部,那麼它就可以被運送給產業處理了。在冰箱儲存六個月之久後,不論如何都無法影響質量。

通过这种方法,可以有效地提高人工栽培天麻产量,同时保证产品质量,为市场提供更优质的产品。