公司寻找药材种植合作天麻蜜环菌萌发菌母种生产技术又将如何
在人工栽培天麻的有性繁殖过程中,萌发菌和蜜环菌这两种共生菌的协同作用至关重要。通过生产实践,我们成功研发出适合两种共生菌生长的培养基及相应的生产技术。以下是具体操作步骤:
培养基配制
1.1 首先,将马铃薯去芽眼、皮层后切片,与硬杂木屑、麦麸和玉米面各50g混合,用自来水或天然水1300mL煮沸30分钟后过滤取液,补充至1000mL,然后加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g以及蛋白胨0.5%和VB1(维生素B复合物)10mL等溶剂进行均匀混合,最终将其装入500ml三角瓶或罐头瓶,每个容量约150ml,也可装入试管内,每个为容积的一半,并用棉花塞口。
1.2 制作固体斜面培养基时,将上述滤液加热溶化并补充至1000mL,再加入琼脂18g进行混合,在温度适宜时搅拌均匀,然后分装于试管内,占据每个试管容积四分之一部分,并用棉花塞口。
1.3 木屑培养基则由硬杂木屑50%,玉米芯25%,麦麸15%,玉米面10%组成,其中添加了葡萄糖0.5%、蔗糖0.5%、石膏1%、石灰0.5%、磷酸二氢钾0.2%和硫酸镁0.1%,最后在接近70%含水量时进行充分拌匀并填充到试管中,使其占据一半空间,然后用棉花塞口。
2 灭菌
使用手提式高压灭菌锅或者民用高压锅对所有培养基进行灭菌。
对于液体和斜面固体培养基,保持蒸汽压力达到14kg/平方厘米后稳定30分钟待温度降低至50~70℃才出锅;对于斜面的固体培养基,在凝固前需倾斜成一定角度。
对于木屑培养基,则保持蒸汽压力达到14kg/平方厘米后稳定45~60分钟自然降温再出锅放置接种箱中。
3 接种
严格按照无菌操作要求在无菌条件下完成接种工作。
对于液态培养,可以直接从母种试管挑取几块带有微生物孢子的小球状材料放入三角瓶中;对于其他类型,可以选择不同大小的样本。
在接種過程中,要确保所有材料都处于无污染状态,以免影响整个实验结果。
4 培養
将接种后的样本立即放入恒温箱或专门用于此类实验的房间内,在22~24℃恒温环境下存储。
液态样本在第二天开始摇动以促进细微生物群落扩散,如果是手动操作,则每日至少摇动6次以上直到第七天左右停止;而且要注意观察是否出现浑浊迹象,因为如果发生污染需要丢弃全部样品内容物。在结束阶段应检查颜色变化,如清澈透明淡茶色土黄色为佳,如果出现不正常情况则需重新处理。
斜面样的收获时间大概是在十到十五天的时候,当检测到细微生物已经完全穿透整根植物时即可采集作为产品使用。如果想要保存可以放在冰箱冷藏室里,不论蜜环还是萌发器官都能保存40~60天不变坏,从而延长它应用期限。