菌类做法

在什么地方收药材的天麻蜜环菌萌发菌母种生产技术

在人工栽培天麻的有性繁殖过程中,需要萌发菌和蜜环菌两种共生菌。笔者通过生产实践,研发出适合两种共生菌生长的培养基及相应生产技术。以下是具体操作步骤:

培养基配制

1.1 在双重锅内煮沸后过滤的液体培养基配方包括马铃薯100g、硬杂木屑50g、麦麸50g、玉米面50g以及自来水1300mL,将其加热30分钟后过滤,并补充至1000mL,再加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g和蛋白胨0.5%混合均匀,然后装入三角瓶或罐头瓶,每个容量约150mL,口部塞上棉花。

1.2 固体斜面培养基则将液体培养基中的琼脂18g溶化并补充至1000mL,加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g和蛋白胨5gL之后,在试管中分装到每个试管容积的四分之一处,用棉花塞紧口部。

1.3 木屑培养基则由硬杂木屑50%(粉碎成小颗粒状)、玉米芯25%(也粉碎成小颗粒状)、麦麸15%和玉米面10组成,并外加了葡萄糖0.5%,蔗糖0.5%,石膏1%,石灰0.5%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸镁0.1%以及VB11%,将所有干料拌均后与含水量为70%的可溶解辅料混合,使其含水率达到70%,然后装入试管并压实到半满,用棉花塞紧口部。

2 灭菌

使用手提式高压灭菌锅或民用高压锅进行灭菌。

对于液体和固态斜面的培养基,在蒸汽压力达到14KPa时保持30分钟待温度降至50-70℃后出锅。

液体直接放入接种箱;固态斜面的需在凝结状态下倾斜成斜面再移入接种箱。

对于木屑培养基,则保持45-60分钟自然降温出锅直接放入接种箱。

3 接种

在无菌条件下严格按照无菌操作要求进行:

- 对于液体细胞,可从母株试管挑取一块大小相当于一个花生米的小块带有多数芽孢子或者细丝部分用于接种三角瓶内;对于固态细胞,可在凝结水形成前即可开始接种,一次可以添加一到三个母株片段;对于萌发器,可以等到表面的凝结水消失再开始一次性添加一到两个母株片段。

4 培育

接種後立即將試管放置於恒溫箱或室內22~24℃恒温調養,並且不進行摇晃直至第7天終止。在终止后的7天左右,即可用于生产。存储时应避免光照,以免影响产品质量。如果观察到了浊度增加或者出现泡沫等情况说明发生了污染,这时候应该丢弃掉这些材料。