在中国中药材交易市场平台上天麻蜜环菌与萌发菌母种的生产技术又将如何革新
在中国中药材交易市场平台上,笔者通过实践探索出适用于人工栽培天麻的共生菌培养基及生产技术。以下是具体操作步骤:
培养基配制
1.1 将马铃薯去芽眼、皮、切片,混合硬杂木屑、麦麸和玉米面,每种50g,用水1300mL煮沸30分钟后过滤取液,补至1000mL,加葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g以及蛋白胨0.5%和VB1 10mL等溶解物质,然后分装于500mL三角瓶或罐头瓶内,每瓶约150mL,也可装入试管内。用棉花塞口并封存。
1.2 制作固体斜面培养基时,将“1.1”步骤中的滤液加入琼脂18g加热溶化后,再加入葡萄糖20g等辅料,补至1000mL后分装于试管内。
1.3 木屑培养基由硬杂木屑50%、玉米芯25%(粉碎成小颗粒)、麦麸15%和玉米面10%,外加葡萄糖0.5%,蔗糖0.5%,石膏石灰各按比例配制。
2 灭菌
使用手提式高压灭菌锅或民用高压锅进行灭菌:
液体和斜面固体培养基保持蒸汽压力为14KPa时稳定30分钟,待温度降至50-70℃后出锅。
斜面固体培养基需在液态时倾斜成斜面,并在自然凝固后移入接种箱。
木屑培养基灭菌时间为45-60分钟。
3 接种
严格按照无菌操作要求进行:
对于液体培养基,只需从母种试管挑取一块带有菌丝的母种放入三角瓶中。
对于斜面的蜜环菌,在凝结水出现时接种;对于萌发菌,在表面无凝结水时接种,每支试管上可接入一到两块母种。
对于木屑培養基地前滅絕後即應急速種植,並確保種子與飼料緊密接觸。
4 培養
将接种后的試管放置於恒温箱或室內,以22-24℃為溫度進行恒温保存:
液體種開始於第二天進行振荡;斜面的蜜環黴需要15天才能贯穿整个原料,而萌發黴則需要更長一些時間;木屑種則經過15-20天後,可見到苗床已經連通整個材料,即可將其用于生产。保存時可以放在冰箱中,不會影響質量。