公司寻找种植项目合作天麻蜜环菌萌发菌母种生产技术难道不是我们该深入探索的方向吗
在人工栽培天麻的有性繁殖过程中,萌发菌和蜜环菌这两种共生菌的协同作用至关重要。通过生产实践,我们成功研发出能够促进两种共生菌同时生长的培养基及相应技术。
培养基配制
1.1 将马铃薯切片后与硬杂木屑、麦麸、玉米面混合,加入自来水煮沸并过滤后调整到1000毫升,再加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁以及蛋白胨等成分,摇匀后分装于三角瓶或罐头瓶内,每个容量约150毫升。此法技术先进,但存储时间有限。
1.2 制作固体斜面培养基时,将上述液体配方中的琼脂溶化后与之混合,并补充至1000毫升,以此为基础制作试管内培养环境。
1.3 木屑培养基则采用硬杂木屑50%、玉米芯25%、麦麸15%和玉米面10%,外加葡萄糖和蔗糖,以及石膏和石灰等成分拌均,加水至70%,然后装入试管并压实,以适当容量填满。这种方法便于邮寄且耐贮藏。
灭菌
使用手提式高压灭菌锅或民用高压锅进行灭菌操作。在蒸汽压力达到1.4千克每平方厘米时保持30分钟至60分钟不等,然后自然降温待温度降低到50℃左右才出锅。接种前需确保温度降至25℃以下。
接种
所有接种工作必须在无菌条件下严格按照无菌操作要求完成。
对液体培养基,只需从母株试管中取一块带有真菌丝的小块(约花生米大小)放入三角瓶中;对于斜面培养基,则在凝结水形成时进行接種,每支试管上可添加一到三个母株小块;而对于木屑培养基,由于不能长期保存,要尽快进行接種,用接種钩轻轻推动,使其紧密贴合于植物质物料上。
培養
将接種后的試管立即放置於恒温箱或溫室內,在22~24℃的環境下進行長期定溫育苗。在整个过程中,对液态孢子进行定時振荡以促進真核生物細胞增殖。当孢子开始顯示正常生長特征,即可用于大规模生产。而对于固體孢子,当孢子的線索穿透了整個斜面的材料,就可以应用於商業用途,並能夠在冰箱內保存較久時間,不論是蜜環霉素還是萌發霉素,都能保持良好的品質。