在人工栽培天麻的有性繁殖过程中，需要萌发菌和蜜环菌这两种共生菌的协同作用。经过实践探索，我成功研发出适合两种共生菌共同生长的培养基及生产技术。以下是具体操作步骤：

培养基配制

1.1 在双重锅中煮沸100g马铃薯（去芽眼、皮）、50g硬杂木屑、50g麦麸、玉米面，并加入1300mL自来水或天然水。在煮沸30分钟后，用双层纱布过滤取出滤液，补充至1000mL，加20g葡萄糖、2g磷酸二氢钾、1g硫酸镁以及蛋白胨0.5%和10mLVB1溶解摇均后，分装于500mL三角瓶或罐头瓶，每瓶装150mL左右，也可装入试管内，每个试管装量为容积的四分之一。三角瓶和试管用棉花塞口，罐头瓶上盖一层塑料布封口后，用皮筋扎紧。

1.2 制作固体斜面培养基时，将按照上述程序制备滤液，然后在滤液中加入18g琼脂并加热溶化，再补充至1000mL，加20g葡萄糖、2g磷酸二氢钾、1g硫酸镁以及5mgVB1全部溶解摇均后，将其分装于试管内，每个试管装量为容积的一分之四，然后用棉花塞口。

灭菌

使用手提式高压灭菌锅或民用高压锅进行灭菌。

2.1 对于液体和斜面固体培养基，在蒸汽压力达到14千克每平方厘米时保持30分钟待锅内温度降至50℃以上才出锅；待温度降到25℃以下时接种；对于斜面固体培养基，当凝结水形成并且呈现倾斜状态（长度约占测试玻璃膏棒长的三分之五）时移入接种箱。

接种

在无菌条件下严格按照无菌操作要求进行。

3.1 对于接种液体培养基，只需从母株试管挑取大小与花生米相近母株块数目的母株块放入三角瓶中；对于接种斜面培养基蜜环菌，可在凝结水形成的时候进行接種；对于接種萌發霉時，要等到表面的凝結水消失再進行，以免影响孢子 萌發。每支試管斜面的上方分别添加一到三个母株块或者两个母亲小球。

4 培養：

接種後立即將其放置於恒温箱或温室內，在22°C至24°C溫度下進行恒溫調節。

- 液體樣本：從第二天開始使用振動器進行搖晃處理，並每天手工搖晃六次。如果使用試管則在完成搖晃後將其傾側放置。在七日內終止營養過程，其成熟狀態應為清澈透明色澤，如果浑浊，即為污染物質應被丟棄。

- 斜面樣本：平放在恒温箱內48小时後觀察是否有生物活躍跡象。一旦感知到了細絲增長並向周圍延伸，這些樣本可以用于生产。一旦细丝贯穿整个细胞，这些样品就可以用于生产了。这类样品保存在冰箱冷藏室，可以存储40-60 天不变质。

注意事项：

在所有滅毒過程都要小心地監控壓力以防突然變化可能導致滅毒效果無效；

成熟后的營養液应为淡茶色，如果出现浑浊，则表示有杂质污染，不得用于生产；

木屑樣本：15~20 天之后，一旦細絲貫穿整個細胞，這些樣品就可以用于生产了。此類型樣品也能長期保存6個月而無法改變質量，但为了避免交叉感染产生杂质，在采用的过程中应该从底部破坏原来的木屑开口重新引入新的木屑样本进行交叉播植。