在人工栽培天麻的有性繁殖过程中，需要萌发菌和蜜环菌这两种共生菌的协同作用。经过实践探索，我成功研发出适合两种共生菌共同生长的培养基及生产技术。以下是具体操作步骤：

培养基配制

1.1 在双重锅中煮沸1000mL水，加入100g马铃薯（去皮、切片），50g硬杂木屑、麦麸和玉米面各50g。在煮沸后过滤，用滤液补至1000mL，加20g葡萄糖、2g磷酸二氢钾、1g硫酸镁以及蛋白胨10mg和VB1 10mL。摇均后分装于500mL三角瓶或罐头瓶内，每瓶装150mL左右，也可装入试管内，以试管容积的四分之一为限。

1.2 制作固体斜面培养基时，将上述液体混合物加热溶解，并补水至1000mL，然后加入18g琼脂，再次加热溶化并补水至含量适宜，最后将所有溶解物添加到滤液中，并搅拌均匀。将其分装于试管内，以每个试管容积之四分之一为限，用棉花塞口。

1.3 制作木屑培养基时，将硬杂木屑占比50%、玉米芯25%（粉碎成小颗粒）、麦麸15%和玉米面10%，外加葡萄糖0.5%、蔗糖0.5%、石膏1%、石灰0.5%等干料拌匀，再将剩余辅料如葡萄糖20%, 蔗糖20%, 石膏30%, 石灰3%, 磷酸二氢钾2%, 硫酸镁10%, VB11％在水中溶解后倒入原料中，使其含水量达到70%，然后充分拌均并压实至半满，每个试管以一半容积填充，按需用棉花塞口。

灭菌

使用手提式高压灭菌锅进行灭菌。

对于液体与斜面固体培养基，在蒸汽压力达标后保持30分钟自然降温出锅；接种前温度降至25℃以下。

木屑培养基则需维持45-60分钟灭菌时间，即使自然降温也应直接放入接种箱。

注意：在开始灭杀之前，要确保锅中的冷空气被排除，然后再施加高压，以防止冲走棉塞。此外，不要急速降低压力以防止污染发生。

3 接种：

在无菌条件下严格按照无尘操作要求进行。

- 液体培养基只需从母株取几块大小约花生米大小的带有孢子的子株放入三角瓶；对于斜面的液态基础，可在凝结形成前进行接种。

- 斜面上可以同时接入多块母株，但要避免接触凝结水，以利蜜环菌早日产生孢子。一旦表面出现凝结就不再接受新植株了。

4 培育：

放置恒温箱或普通室内22～24℃恒温环境下存储待用。

4-1 液态:

从第二天开始使用振动器对植物进行定期摇晃，每天6-8次。如果是在单独的小玻璃实验杯里，那么每一次摇晃之后必须让它们倾斜7天后的产品可以用于生产。如果浓稠或者泡沫很多，那么它已经被细微生物污染，所以应该丢弃掉，因为这样的产品不是我们想要得到的清澈透明状态的情况。

4-2 斜向:

平放48小时观察是否有丝状结构出现。当这些丝状结构扩散并穿过整个实验杯底部即可用于生产。这意味着这个方法更慢一些而且更加耐久，可以保存40天以上冰箱里的蜜环真菌，而能够保存60天以上的是萌发真藻类

4-3 木质:

接收的时候立竖放置以避免震动14到21 天期间，让真藻或真藻类从顶部穿到底部即可用于生产。而且，如果你把这些藏放在冰箱里，它们能保持质量六个月没有任何改变。但如果你想使用久存储的一些木材来做更多工作，你可能会觉得他们感染了其他类型的问题，因此建议从测试底部破开一个孔洞，从那里获取你的植物材料来完成这个任务