在人工栽培天麻的有性繁殖过程中，需要萌发菌和蜜环菌这两种共生菌。通过生产实践，笔者成功研发出适合两种共生菌生长的培养基及相应的生产技术。

培养基配制

1.1 将马铃薯（去芽眼、皮、切片）100克、硬杂木屑50克、麦麸50克和玉米面50克放入双层锅中，用自来水或天然水1300毫升煮沸30分钟后过滤取液，补充至1000毫升，然后加入葡萄糖20克、磷酸二氢钾2克和硫酸镁1克，再加蛋白胨10毫升VB1溶液，使其均匀混合后分装于500毫升瓶内，每瓶装150毫升左右，也可装入试管内，每个试管容纳量为原容积的四分之一。将三角瓶和试管口塞棉花，将罐头瓶口封上用2层牛皮纸或4层报纸覆盖一层塑料布，并用皮筋扎紧。这种培养基特点是技术含量高，可快速繁殖，但不能长期保存。

1.2 制作固体斜面培养基时，将“1.1”步骤中的滤液加入琼脂18克，加热溶化并补充至1000毫升，然后加入葡萄糖20克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁1克和蛋白胨5 克再次加热溶解并补充至1000 毫升，趁热加入VB10 毫升使其均匀混合后分装于试管内，每个试管容纳量为原容积的四分之一，然后用棉花塞紧。

1.3 木屑培养基由硬杂木屑50%、玉米芯粉碎成小颗粒状25%、麦麸15% 和玉米面10% 组成，并添加葡萄糖0.5%，蔗糖0.5%，石膏石灰各石灰各石膏各比例与其他材料拌匀，再将所有可溶解辅料（如：碳素盐类等）与水混合并拌入原料中，使其含水率达到70%，然后充分拌均后填满每个试管，在压实后使用棉花塞紧。此种培养基特点耐贮藏便于邮寄。

2灭菌

使用手提式高压灭菌锅或者民用高压锅进行灭菌操作。

2.1 对于液体和斜面固体培养基，在蒸汽压力达到14千帕斯卡时保持30分钟直到温度降至60℃以下出锅。在接种前需待温度降至25℃以下。如果是斜面的则在凝结状态下倾斜成斜形以便凝固之后移进接种箱。

2.2 对于木屑培养基，则在蒸汽压力达到14千帕斯卡时保持45-60分钟自然降温出锅直接放置接种箱中。

注意：在开始灭菌之前，要确保炉火稳定且内部冷空气排尽；调整调节阀门以维持恒定的密度。当停止减压过程时，不要过快，以防止冲掉棉塞。

3接種

严格按照无污染条件下进行无机质操作要求执行。

3. 接種時對於液體之母種只需從試管內挑選大小為一顆豆子的母種植入三角瓶內；對於試管之內則可以少一些。而对于斜面的蜜环菌，当表面出现凝结水时进行接种，每支试管上方分别添加一到三个块母种；而对于萌发菌，则在没有凝结水的情况下进行，一到两个块母种即可。这一步最好是在准备好的无尘工作台上完成，以免引起污染。

4 培養

从被植株开始，在22-24摄氏度环境下的恒温条件下继续孵育。

4. 在处理期间，从第二天开始启动摇床振荡孵化器；如果手动摇动，可以每日至少6-8次。若是使用了标准玻璃测试塔或微型生物反应器，这些设备可以自动震荡以促进细胞增长。一旦植物生命迹象出现，即进入最后阶段，一般情况下7天结束。但如果发现任何不正常现象，如浑浊色泽变化或泡沫增多，那么整个物品必须丢弃，因为可能已经受到细菌感染影响。如果孵化结果良好，它应该清澈透明，有淡茶色或者土黄色代表着健康状态，而不是像泥泞一样混浊，或呈膜状泡沫样就说明了它已经受到了细微污染，因此不可用于进一步实验目的。

对于固定倾向性的催熟物品，可以轻松找到显著扩散开来的丝线网络，并随着时间推移逐渐形成一个完整的人造环境。这通常需要几周时间才能完成，但最终产出的产品质量非常优良且具有很强抗病能力。而那些存放在冰箱里的苗床储存40天以上仍旧保持完美状况，而另一方面，对待更短期间隔也有相同效果。不过，如果计划让这些苗床经过更长时间储存，那么它们会持续提供最佳性能直到六个月后的某一刻，无论如何都不会失效。在这个过程中，为避免未来的污染问题，我们建议你从底部破坏一次性塑料杯壁，让它们成为真正的一次性用品，这样就能保证你的苗床始终处于安全状态。