基于纳米金和辣根过氧化物酶双标记抗体的黄曲霉毒素B1高灵敏检测方法研究与应用

本文旨在通过建立一种基于纳米金颗粒（AuNPs）和辣根过氧化物酶（HRP）双标记黄曲霉毒素B1单克隆抗体的酶联免疫检测方法（HRP-AuNPs IC-ELISA），提高对该有害成分的快速定量检测能力。首先，研究设计了实验方案，选择合适的样本材料，并进行了AFB1标准品的准备工作。接着，对于构建双标记抗体，采用了纳米金颗粒修饰技术，使得在光谱学特性上实现了更好的可控性。此外，本文还对所采用的辣根过氧化物酶进行了一系列优化处理，以确保其最佳活性。

在实际操作中，我们发现使用这种新型检测方法可以达到极低的下限值，即0.017ng/mL，这对于监测环境污染、食品安全和动物健康都具有重要意义。此外，该方法对于黄曲霉毒素B2、G1、G2和M1等其他类似结构的小分子有较低的交叉反应率，而几乎不与赭曲霉毒素A、伏马毒素B1、桔青霉素、展青霉毒素以及玉米赤霉烯酮等其他类别的大分子发生交叉反应。

为了验证此次建立之法是否可行，本组进一步测试了该方法在玉米和面粉样本中的加标回收率，并将结果与LC-MS/MS同时分析比较。这一结果显示出两种不同分析手段之间存在良好的相关性，从而证明了HRP-AuNPs IC-ELISA作为一种有效工具，可以广泛应用于食品安全领域。

综上所述，本文成功地开发了一种结合纳米技术与生物识别原理的手动或自动化HPLC系统，可以实现对多种农产品及饲料中微量黄曲霁病毒b2含量的一步式快速定量分析，为解决这一全球性的食品安全问题提供了一种实用且经济高效的手段。