在探索天麻蜜环菌与萌发菌母种生产技术的同时我们不禁要问板蓝根的种植方法又是怎样的呢其所需的条件又是什
在人工栽培天麻的有性繁殖过程中,需要萌发菌和蜜环菌这两种共生菌的协同作用。为了提高生产效率,我通过实践研究,成功制备了适合两种共生菌共同生长的培养基,并总结了一套生产技术。以下是具体步骤:
培养基配制
1.1 在双重锅中煮沸马铃薯、硬杂木屑、麦麸和玉米面等原料后,用双层纱布过滤取液体,然后加水至1000mL,再加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g以及蛋白胨0.5%与VB1溶液10mL进行混合均匀。
1.2 制作固体斜面培养基时,将上述配好的液体添加琼脂18g并加热溶化后,再次补充至1000mL,然后加入其他辅料并摇均分装于试管内。
1.3 木屑培养基则由硬杂木屑50%、玉米芯25%(粉碎成小颗粒)、麦麸15%及玉米面10%,外加葡萄糖0.5%,蔗糖0.5%,石膏1%,石灰0.5%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸镁0.1%及VB120%组成,拌均后含水量为70%.
灭菌
使用手提式高压灭菌锅或民用高压锅,对液体和固体培养基进行30分钟以上的灭菌操作;对于木屑培养基,则需45~60分钟。在自然降温后,将培养基放入接种箱。
3 接种
在无菌条件下严格按照无菌操作要求进行。
对于液体培养基,只需从母种试管挑取花生米大小的母种块直接接入三角瓶中。
对于斜面培养基,在凝结水出现时接種蜜环菌,每支试管可加入一到三块母种;而在无凝结水的情况下接種萌发菌,每支试管可加入一到两个块。
对于木屑培養基地 immediatly after滅燒進行接種,以免長時間保存導致污染。
4 培養
接種後立即將試管置於恒温箱或室內22℃左右環境下進行恒溫孵育。在這個過程中:
- 液體種應從第二天開始使用摇床振荡孵育,並每日手工摇动6-8次。如果為試管裝置,可在shake後傾斜放置。七天左右結束孵育並準備使用。此時,孵育出的文化應該是清澈透明或者淡茶色,如果發現浊度增加或形成膜狀泡沫則表示污染,必須棄掉。
- 斜面種應平放48小时以觀察是否出現細胞分裂迹象。当11至15天之后,即當植物根系穿透整個物質時,可以用于生产。此時可以將之放在冰箱存儲40天以保存蜜環蟲,一直可以保持60天以保存萌發蟲。
- 木屑種應竖立存储避免振動,在15至20天之后,当植物根系穿越整个物质时即可用于生产。一旦将其存放在冰箱六个月,它們仍然保持质量不变。但要注意,由於可能會感染雜蟲,所以在運輸過程中要特別小心處理,以防止污染。