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在中药材种子交易网上天麻蜜环菌与萌发菌母种的生产技术又能否更上一层楼

在中药材种子交易网上,笔者通过实践探索出适用于人工栽培天麻的共生菌培养基及生产技术。以下是具体操作步骤:

培养基配制

1.1 将马铃薯去芽眼、皮、切片,混合硬杂木屑、麦麸和玉米面,每种50g,用水1300mL煮沸30分钟后过滤取液,补至1000mL,再加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g以及蛋白胨溶液(10%),摇均后装入三角瓶或罐头瓶,每个装150mL左右,也可装试管内至容积的1/4。用棉花塞口。

1.2 制作固体斜面培养基时,将过滤后的液体加琼脂18g加热溶化后补至1000mL,然后加入葡萄糖20g等辅料,并摇均分装于试管内至容积的1/4,用棉花塞口。

1.3 木屑培养基由硬杂木屑50%、玉米芯25%(粉碎)、麦麸15%和玉米面10%,外加葡萄糖0.5%等辅料拌均,使其含水量为70%,然后充分拌均并压实于试管内至容积的半部分,用棉花塞口。

灭菌

使用手提式高压灭菌锅或民用高压锅进行灭菌。对于液体和斜面固体培养基,蒸汽压力达到1.4kg/cm²后保持30分钟待温度降低到50-70℃才出锅;木屑培养基则需45-60分钟。在自然降温后直接放入接种箱。

接种

在无菌条件下严格按照无菌操作要求进行:

液体培养基仅需从母种挑取小块母种接入三角瓶中。

斜面培養基蜜环菌在凝结水时接種,一般每支试管斜面上接入一到三个母種;萌发菌则在表面无凝结水时再接種,每支试管斜面的数量相同。

木屑培養基地立即使用,不可存放,在接種時應該將種子與媒介緊密聯繫以利於發育。

培養

放入恒温箱或实验室恒温环境22-24℃静态定位14天以上,即可用于生产。注意观察是否有污染迹象,如浑浊或大量泡沫出现应废弃。此外,还需要考虑保存条件,以保证产品质量。