以豆渣为主料液体深层培养香菇菌丝体的研究

近年来，随着市场对香菇多糖需求量的增大，利用液体深层发酵培养香菇菌丝体的研究逐渐增多，但以豆渣为主料液体深层培养香菇菌丝体的研究尚未见报道。为此，笔者利用豆渣及洗渣水，应用正交试验法对香菇液体发酵最佳培养基及发酵条件进行筛选研究，旨在二次利用豆粉生产的下脚料—豆渣，同时为香菇液体发酵寻求一种新的原料，节约粮食资源。 1 材料与方法 1.1材料 1.1.1菌种 香菇（L109）由佳木斯大学生命科学学院微生物实验室保存。 1.1.2培养基 改良PDA培养基：马铃薯20g（煮汁），麸皮5g（煮汁），葡萄糖2g,琼脂2g,水100 mL,121 ℃下灭菌20 min。 种子培养基：麸皮5g（煮汁），葡萄糖2g,洗渣水100mL,0.1MPa灭菌15min。 发酵培养基：洗渣水100 mL,MgSO4、葡萄糖、KH2PO4和豆渣的配量经正交试验确定，0.1 MPa灭菌15 min。 对比培养基:葡萄糖2.0g,黄豆粉2.0g,KH2PO4 0.1g,MgSO4 0.1g,水100 mL,0.1 MPa灭菌15 min。 1.2方法 1.2.1原料的制备 豆渣（即豆粉生产的下脚料）：大豆加水磨浆，分离豆乳后剩余的固形物（含水约87%）。 洗渣水：豆渣加1~2倍重量的水，搅拌均匀后，过滤得到的滤液。 1.2.2菌种活化 将香菇菌种转接至改良PDA斜面培养基，置于培养箱25 ℃恒温培养6~7d,菌丝长满试管。 1.2.3液体种子的制备 250 mL三角瓶装种子培养基80 mL,加玻璃珠4~5粒，接入3块黄豆粒大小的香菇活化菌种，于180 r/min旋转式摇床25 ℃震荡培养5~6 d即可。 1.2.4发酵培养基的优化 应用正交试验法对香菇液体发酵培养基的4种营养物质葡萄糖、MgSO4、KH2PO4和豆渣在3个水平上进行正交试验。选择正交试验进行发酵培养基的优化。 1.2.5发酵条件的优化 应用正交试验法对发酵时间、装液量以及发酵温度3个因素在3个水平上进行正交试验，选择正交试验进行发酵条件的优化。 1.2.6对比试验 分别采用优化后的液体发酵培养基和对比培养基，在优化的发酵条件下进行发酵试验，对比菌丝体生物量和生物转化率。 1.2.7菌丝体生物量的测定 发酵液经两层纱布过滤得菌丝体，菌丝体经蒸馏水冲洗数次后，于60 ℃干燥至恒重，电子天平称重，测得菌丝体生物量。 1.2.8生物转化率的计算 生物转化率（%）=菌丝体干重培养基中碳氮源干重×100;培养基中碳氮源干重=碳源重量×（1-碳源含水量%）+氮源重量×（1-氮源含水量%）。 2 结论与讨论 利用豆渣及洗渣水进行液体培养香菇菌丝体的最佳培养基配方为：葡萄糖2%,豆渣9%,MgSO4 0.05%,KH2PO4 0.1%,以洗渣水代替水进行配料；实验室最佳发酵条件为：发酵时间?6 d,装液量80 mL/250 mL三角瓶，发酵温度25 ℃。 利用豆渣和洗渣水培养香菇菌丝体经实验室研究证实工艺可行，工业化利用豆渣及洗渣水液体培养香菇菌丝体的工艺条件尚需放大实验研究获得。 以豆渣及洗渣水为原料培养香菇菌丝体，发酵液变透明，说明菌丝体生长过程中可以利用大豆纤维、大豆蛋白和大豆多糖等大分子物质。 利用豆渣和洗渣水培养的香菇菌丝体与野生香菇的营养成分异同还有待进一步研究。