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灰树花海藻糖合成酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

灰树花海藻糖合成酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

Cloning and Expression of Grifola frondosa Trehalose Synthase Gene in Escherichia coli

徐志祥李刚王震宇李宝健

摘要:海藻糖主要作用是作为生物体的结构组分、以及保护生物膜和保护蛋白质.在灰树花中,海藻糖在干重中所占比例最高可达到15%~17%,说明灰树花合成海藻糖的能力很强.将灰树花海藻糖合成酶基因克隆,并在大肠杆菌表达系统里表达.表达量为190mg/L.通过活性测定,证明在大肠杆菌中表达的海藻糖合成酶具有酶活性,结合基因工程和酶工程方法,为合成海藻糖的研究提供了新的方向.

关键词:灰树花, 海藻糖合成酶基因, 蛋白表达

分类号:Q939.96 文献标识码:A

文章编号:0001-6209(2004)04-0540-03

基金项目:广州市科委重大科技攻关资助项目(2001-Z-006-01)

作者简介:徐志祥(1975-),男,江西波阳人,博士,从事药用真菌的发酵工程和分子生物学研究.E-mail:xuzhixiang123@163.net 李宝健,通讯作者.Tel:86-20-84035179;E-mail:lsbrc12@zsu.edu.cn

作者单位:徐志祥(中山大学生命科学院,基因工程国家教育部重点实验室,广州,510275)

李刚(中山大学生命科学院,基因工程国家教育部重点实验室,广州,510275)

王震宇(中山大学生命科学院,基因工程国家教育部重点实验室,广州,510275)

李宝健(中山大学生命科学院,基因工程国家教育部重点实验室,广州,510275)

参考文献:

[1]徐锦堂. 中国药用真菌学. 北京: 北京医科大学中国协和医科大合出版社, 1997,707-717.

[2]杉本利行. 糖类新资源的开发现状和应用. 食品工业, 1994,34-38.

[3]罗明典. 微生物生产海藻糖及其应用前景. 微生物学通报, 1996,23(4):252-254.

[4]Yoshida M,Nakamura N,Horikoshi K. Production of trehalose by adual enzyme system of immobilized maltose phosphorylase and trehalos ephosphorylase. Enzyme Microb Technol, 1998,22: 71-75.

[5]Sambrook J, Fritsch E F, Maniatis T. 分子克隆实验指南. 金冬雁,黎孟枫,等译.第二版.北京:科学出版社,1992.

[6]于春燕. 海藻糖研究进展. 青岛大学学报, 2000,13(2): 55-59.

[7]吴丹,仇华吉,童光志. 几种表达系统的比较.生物技术通报,2002,2: 30-34.

微生物学报

ACTA MICROBIOLOGICA SINICA

2004 Vol.44 No.4 P.540-542